Изучение ингибирующего влияния различной концентрации Аральской соли на тест-организмы

UDC 57.025
Publication date: 30.04.2018
International Journal of Professional Science №2-2018

Изучение ингибирующего влияния различной концентрации Аральской соли на тест-организмы

Study of the inhibiting influence of various concentration of Aral salt on test organisms

Тлеукеева А.Е., Исаев Е.Б., Рубцова Л.В, Исаева А.У.
Казахстан, г.Шымкент, Южно-Казахстанский государственный университет им.М.Ауезова

Tleukeyeva A.E., Issayev E.B., Rubtsova L.V., Issayeva A.U.
Kazakhstan, Shymkent, South-Kazakhstan State University named after M.Auezov
Аннотация: Экологическая проблема территории рядом с Аральским морем до сих пор является актуальной. Пыльные бури с большим содержанием солевых частиц и высококонцентритованная вода самого моря является ингибирующим фактором для жизнедеятельности живых организмов. В воде Аральского моря биоценоз гидробионтов малочислен, присутствуют только галофильные формы диатомовых водорослей. Растения на близлежащих территории моря тоже не отличаются разнообразием. Основной целью исследования являлось определение минимальной концентраций раствора соли, ингибирующий развитие тест-организмов. Объектами исследований являлись накопительные культуры одноклеточных организмов, а также некоторые виды культурных растений. При исследовании применялись два основных метода: моментальное и длительное влияние различных концентраций солевых растворов. Подготовка растворов для опытов были изготовлены согласно ГОСТам 4517-87 и 25794.1-83. По результатам работы, было выявлено что соль Аральского моря при концентрации от 1-5% является активатором роста растений и простейших, при 10-23% обладает бактериостатистическим в отношении гидробионтов, а при концентрации выше 23% бактериоцидным действием.

Abstract: The problem of the ecology of the territory next to the Aral Sea is still topical. Dust storms with a high content of salt particles and highly concentrated water of the sea itself is an inhibitory factor for the vital activity of living organisms. In the water of the Aral Sea, the biocoenosis of hydrobionts is small, only halophilic forms of diatom algae. Plants on the nearby sea territory also do not differ in variety. The main purpose of the study was to determine the minimum concentration of salt solution inhibiting the development of test organisms. The objects of research were accumulative cultures of unicellular organisms, as well as some types of cultivated plants. Two main methods were used in the study: immediate and long-term effects of various concentrations of saline solutions. Preparation of solutions for the experiments were made in accordance with GOST 4517-87 and 25794.1-83. According to the results of work, it was found that the salt of the Aral Sea at a concentration of 1-5% is an activator of plant growth and protozoa, at 10-23% has bacteriostatic in relation to hydrobionts, and at a concentration above 23% bacteriocidal action.
Ключевые слова: Аральское море, морская соль, лимитирующие факторы, галофиты, стрессоустойчивость

Keywords: Aral Sea, sea salt, limiting factors, halophytes, stress resistance


Введение

В настоящее время состояние Аральского моря является одной из основных экологических проблем Казахстана. Уровень воды уменьшился более чем на 20 метров, береговая линия в некоторых местах отступила на 100 км  [1-2].  Бывшая акватория уменьшилась на 70% и продолжает снижаться. Соленость воды в море достигала местами 60 граммов на литр. В окружении трех пустынь, с пыльными бурями, ветер распространяет соль на большие расстояния  [3-4]. Этот фактор негативно влияет на флору и фауну Приаральская зоны.

Засоление является масштабной экологической проблемой для природных водоемов, которое может быть серьезным экологическим стрессом для организмов-гидробионтов, способно нарушать целостность физиологических и биохимических процессов, вызвать серьезные изменения в метаболических реакциях [5]. Растворимость в воде обусловлена иссушением водоемов, вымыванием солей из почв, содержащих минеральные соли, а также антропогенным воздействием.

По данным Яблонской, Новожиловой и Березиной, за 1961 год, солёность в открытой части акватории составляла 8-10 %о, флора и фауна носили преимущественно пресноводный характер [6-8]. Галофильные организмы жили в мелководных заливах с более высокой солёностью, а  роль фитопланктона была незначительна.

В исследованиях Доброхотовой [9] и Андреева [10] было выявлено, что количество мактофитов сократилось с 37-ми до 5 видов, а донных безпозвоночных с 61-го до 27 видов. В начале 2009 года флора макрофитов сократилась до 1 вида. При солёности до 116 %о в Арале отмечали Cladophora fracta, С. glomerata и Vaucheria cf. dichotoma. При 134 %o Vaucheria уже отсутствовала, при 136 %о развивалась только С. fracta. По данным Сапожникова [11], отмечено формирование 5-ти «зон влияния» (преимущественного развития) микрофитов по глубинам обитания: ропалодиальную, верхнюю бацилляриальную, талассиофизальную, а также промежуточную и нижнюю бацилляриальные. На стадии ультрагалинизации Большого Аральского моря в условиях ускоренного роста минерализации и биотопической метаморфозы флора дна микрофитов не деградировала. Число видов, высоко достоверно исчезнувших из Большого Арала за период исследований (42), и число появившихся видов (44) очень близки — общий баланс флоры почти нейтрален. Направленного падения разнообразия и выравненно на данном этапе отмечено не было.

Изучение солевой толерантности растений имеет большое практическое значение, поскольку океаны, воды которых содержат 3-4% солей, занимают около 75% поверхности Земли, 25% солей планеты являются физиологическими, а одна треть земные земли под ирригацией уже были изменены в сторону избыточной соли из-за плохого дренажа.

Факт повышенной гидрофильности биоколлоидов у солончаковых форм растений, находит также отражение в повышенном содержании воды в листьях, в их меньшей транспирации и большей водоудерживающей способности. Объяснение причин пониженной транспирации и повышенной удерживающей способности воды при наличии гидрофильности коллоидной системы растений из засоленной почвы следует из утверждений А. М. Алексеева [12] о том, что во время испарения используется свободная вода. И снижение транспирации имеет место при засолении, т. к. увеличивается содержание коллоидносвязанной воды.

Влияние концентрированной морской соли на гидробионты и растения плохо изучено. И ингибирующий фактор соли Аральского моря в окружающей среде изучается в меньшей степени.

Цель исследования-определение минимальной концентраций раствора соли, ингибирующий развитие тест-организмов, а также выявление устойчивых видов растений и микроорганизмов, для улучшения местного биоценоза.

 

 

Материалы и методы

Объектами исследований являлись накопительные культуры диатомовых, зеленых водорослей и простейших. А также семена культурных растений бобовых, злаковых, редиса.

Подготовка растворов для опытов были изготовлены согласно ГОСТам 4517-87 и 25794.1-83 [12-13].

При проведении опыта по влиянию растворов солей на гидробионты диапазон концентрации растворов составил 1-100%. Опыт проводился в два этапа. В первом опыте тест-организмы инкубировали в соленой воде в течении 72 часов. Микроскопирование проводилось каждые 2-5 часов. На втором этапе проводилось исследование на мгновенную реакцию тест-организмов. То есть концентрированная солью вода добавлялась непосредственно на предметное стекло, где уже были тест организмы.

При проведении опыта с высшими растениями посуда и вермикулит стерилизовались. В контрольном варианте полив проводился с использованием дистиллированной воды, а в опытных вариантах с процентными растворами диапазон концентрации составил 1-10%. Выборка семян проводилась по 5 штук на каждый стакан. Опыт длился в течении 7 суток. В опыте учитывалось количество всходов, высота стебля, количество листьев, длина корня.

Результаты исследования и их обсуждение

По результатам исследований влияния растворов солей на гидробионты  было выявлено, что при концентрации от 1% до 5% соль обладает активирующим эффектом для тест-организмов. Диатомовые водоросли увеличились в биомассе. Зеленые водоросли активировали процесс фотосинтеза. А жизнедеятельность простейших организмов ускорилась (рисунок 1).

Рисунок 1. Реакция тест-организмов на различную концентрацию соли

 

При концентрации выше 10% можно заметить замедление двигательности у зеленых водорослей и простейщих, у некоторых зеленых водорослей начался процесс плазмолиза. С концентрации раствора выше 25% у тест-организмов наблюдалось полное отсутсвие движения и плазмолиз происходил после 2-5 минут после добавления раствора. При 100% концентрации плазмолиз в клетках наступал моментально.

На втором этапе исследований при микроскопировании можно было наблюдать при низкой концентрации соли статику водорослей и простейших, а при более высокой концентрации плазмолиз ( таблица 1).

 

Таблица 1

Влияние различных концентраций соли на водоросли

 № Название тест-организма Контроль Аральская соль
Статика Плазмолиз
1-10% 15-50% 50-100% 1-10% 15-50% 50-100%
1 Chlorella vulgaris AsLi-1 10 0 5 10 0 0 3
2 Chlorella vulgaris AsLi-2 10 0 4 9 0 0 5
3 Rhaphoneis amphiceros 10 2 10 10 0 1 10
4 Gonium sp 10 8 10 10 0 1 10
5 Volvox sp 10 0 4 10 0 0 0
6 Euglena sp. 10 0 8 10 0 0 10
7 Pyxilla gracilis 10 10 10 10 0 3 10
8 Thalassionema nitzschioides 10 10 10 10 0 4 10
9 Ameba sp 10 0 10 10 0 10 10
10 Pinnularia sp 10 10 10 10 0 2 10

 

По данным таблицы можно отметить, что при низкой концетрации солей влияние на фитопланктон минимально (рисунок 2).

Рисунок 2. Клетки диатомовых до опыта (слева Pinnularia, справа Rhaphoneis)

 

Но при больших концетрациях разрушение клетки путем плазмолиза наступает моментально (рисунок 3). Кроме этого, влияние солей на простейшие губительно даже при низких концентрациях. Диатомовые водоросли более устойчивы к солям, то есть являются галофилами.

Рисунок 3. Диатомовые водоросли в стадии плазмолиза: А- Coscinodiscus sp.         Б- Pinnularia sp., В,Г Rhaphoneis amphiceros, Д- Cymbella

В результате исследований различных концентраций соли на культурные растения были получены следующие результаты.

Влияние соли на бобы фасоли обыкновенной (Phaseolus vulgaris) показало, что при концентрациий в 1%, раствор соли повышает развитие растений, ускоряет их всхожесть. А при концентрации 5-10% развитие стеблей и листьев замедляется, при том, что корневая система активна.

Рисунок 4. Опыты с бобами Phaseolus vulgaris

 

В опыте с овсом посевным (Avéna satíva) при концентраций в 1% заметно замедление развития,по сравнению с контрольным вариантом.  При более высокой концентрации высота стеблей низкая, средняя высота 8,0±0,5см, а корневая система более развита.

Рисунок 5. Опыты с семенами Avéna satíva

 

В опыте с редисом (Raphanus sativus) растения оказались более устойчивы к высоким концентрациям соли. Так в варианте с 1% и 5% раствором растения развивались активнее,чем в контроле. Окрас листьев был более насыщен, и площадь листа была больше на 37%, чем в контроле. В 10% растворе развитие растений замедлилось, но всхожесть составила 100%.

Рисунок 6. Опыт с семенами Raphanus sativus

 

Таким образом, можно заключить, что соль Аральского моря при концентрации от 1-5% является активатором роста растений и простейших, при 10-23% обладает бактериостатистическим в отношении гидробионтов, а при концентрации выше 23% бактериоцидным действием. Кроме этого, простейшие более чувствительны из изменениям концентрации соли, за счет тонких клеточных стенок, а диатомовые водоросли обладают высокой галофильностью.

References

1. А.Власов: Проблема Аральского моря - есть ли пути решения? 2010. http://www.centrasia.ru/newsA.php?st=1287809160
2. Аральский кризис: пустынное море или морская пустыня? 2010. http://www.google.ru/url?q=http://www.interfax.by/article/72344&sa=U&ei=Pl4LTYKEM4n44gau0-CGDQ&ved=0CCAQFjAJOBQ&usg=AFQjCNFO1weROffubZqrmVmRC7S5ZEWPwA
3. Аральское море. XXI век. Неофициальный сайт. http://www.google.ru/url?q=http://aral21.narod.ru/daniue.htm&sa=U&ei=IakLTayOCpWg4Qbpt73jDA&ved=0CBgQFjAG&usg=AFQjCNH-nNEzislH54oBk7GLXyNW2Nct-w
4. Аральское море - введение в проблему. Наука и жизнь, 2002, № 12.
5. “Экологические проблемы эрозии почв и русловых процессов: Сборник”/Под ред. Р.Ч. Чалова. М.: изд. МГУ, 1992- 112с.
6. Яблонская Е.А. История изучения и состав фауны беспозвоночных Аральского моря (введение к Атласу беспозвоночных Аральского моря)//Атлас беспозвоночных Аральского моря. - М.: Пищ. пром-ть, 1974. - с. 3
7. Яблонская Е.А. О сезонной динамике бентоса Аральского моря// Сборник работ по ихтиологии и гидробиологии. Вып.3. - Алма-Ата: АН Казах.ССР, 1961. - с. 71 - 92
8. Новожилова М.И., Березина Ф.С. Первичная продукция фитопланктона в Аральском море // Биологические процессы в морских и континентальных водоемах: Тез. докл. 2 съезда ВГБО. -Кишенев. 1970. - С. 282-283.
9. Доброхотова К.В. Некоторые данные о продуктивности гидромакрофитов Аральского моря // Ботан. журн. 1971. - № 12. - С. 1759-1771.
10. Андреева С.И., Андреев Н.И. Отношение дрейссен Аральского моря к повышению солености (наблюдения в природе и эксперимент) // Рукопись деп. в КазНИИНТИ. 16.08.88. № 2280 Ка 88,- Петропавловск, 1988. 11 с.
11. Алексеев А.М. Водный режим клеток растения в связи с обменом веществ и структурированностью цитоплазмы. М.: Наука 1969. 36 с.
12. ГОСТ 4517-87. Реактивы. Методы приготовления вспомогательных реактивов и растворов, применяемых при анализе
13. ГОСТ 25794.1-83. Реактивы. Методы приготовления титрованных растворов для кислотно-основного титрования